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CRISPR/Cas9载体构建产品
CRISPR/Cas9技术简介
CRISPR/Cas系统是在大多数细菌ㄨ(40%)和古细菌(90%)中发现的一种天然免疫系统,可用来对抗入侵的病毒及外源DNA。
CRISPR指的是规律成簇的间隔短回文重复(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats)。 Cas(CRISPR-associated genes)为CRISPR相关基因。
当噬菌体感染细菌后,病毒DNA进入细菌细胞,细菌细胞表达Cas复合体对噬菌体DNA进行切割得到间隔序★列,间隔序列在cas1 和cas2作用下插入到CRISPR最前端形成免〓疫。
2013年1月,在Science上发表了两篇以链球菌CRISPR/Cas9系统为基础对哺乳动物细胞进行基因组编辑新方〓法,利用一条gRNA(guid RNA)模拟成熟的 crRNA-tracrRNA复合体与Cas9共同作用切ㄨ割靶基因组(如下图),由此揭开了该技术的运用高潮。
吉玛基因的提供多种Cas9表达载体,可同时表达Cas9与gRNA(1个,2个),并含有抗性基因或荧光基因,可有效富集转染细胞,提高基因编辑效率,相关载体都经过验证,具有高效基因编辑效率。
载体编号及名称
规格
完成周期
备注
pGE-1(pU6gRNA)
50μg
10个工作日
单gRNA
pGE-2(pU6gRNACas9puro)
50μg
10个工作日
单gRNA+Cas9,并带有抗性◆基因
pGE-3(pU6gRNACas9EGFP)
50μg
10个工作日
单gRNA+Cas9,并带有荧光
pGE-4(pU6gRNA1U6gRNA2Cas9puro)
50μg
10个工作日
双gRNA+Cas9,并带有抗性基因
pGE-5(pU6gRNA1U6gRNA2Cas9EGFP)
50μg
10个工作日
双gRNA+Cas9,并带有荧光
pGE-6(pU6gRNACas9)
50μg
10个工作日
单gRNA+Cas9
吉玛基因Cas9载体图︼谱如下:
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Chuan-Le Xiao, Song Zhu, Minghui He et al. N6-Methyladenine DNA Modification in the Human Genome. Molecular Cell 2018 Jul 19; 71: 306-18.
Tingting Cai, Jieqi Zhou, Yuanyuan Zeng et al. EVI5 is an oncogene that regulates the proliferation and metastasis of NSCLC cells. Molecular Cell 2020 May 11;39:84.
Linbin Yang, Qiang Liu, Xiaoqian Zhang et al. DNA of neutrophil extracellular traps promotes cancer metastasis via CCDC25. Nature 2020 Jun 11;583(7814):133-138.
订购须知
非套餐基因编辑∞载体:
客户提Ψ 供序列,保证序列构建正确,提供测序结果▃,不⊙保证编辑效应,无效不予退款。如需验证,费用需要另行收费。
套餐基因编辑载体(3个或对靶点) 套餐(一个基因3个或3对双gRAN靶点):
针对人源的三条单gRNA或双gRNA保证至少有一条在常♀规细胞如293细胞中有编辑效应(T7核酸Ψ内切酶,PCR或测序有一种方法证实↑即可),如果客户反馈无效a. 需要︽提供如下材料(293T转染效率,检测具〖体方法步骤)经公司技术确认可以免费重新构建一次或退票¤,如已经付款可以做成预付款抵扣公司其他产品◣或服务;b. 如果重新设☆计3对再次无效则不再免费重新设计,再次设计需要款到发货;c. 如果客户细胞转染ω不进去导致无效或者非人源物种,则不再↑投诉受理范围;d. Cas9和gRNA均为本公司配套产品,非本公司配套产品不做单独效果保证。
如果※经过公司293T验证有编辑效应(T7核酸内切酶,PCR或测序有一种方法证实即可),并提供PDF版本验证结】果(验证结果产权不属◆与客户),客户如需验证结果完整服」务报告,需要另行支付验证费用6000元,并支付前期货款,收到货款后提∑ 交全部原始结果。如果验█证无效,可以免费重新设计3个靶点或退□票退款或做预付款。如果再次无效则不再免费重新设计◢,已经★付款做预付款处理。